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生化实验室(8)——过氧化氢酶(POD)活性的测定

星期三, 五月 21st, 2008

2008-05-21

生化实验室(8)——过氧化氢酶(POD)活性的测定

实验目的:植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化,如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明,植物在逆境胁迫或衰老过程中,细胞内自由基代谢平衡被破坏而有利于自由基的产生。过剩自由基的毒害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用,造成细胞膜系统的损伤,严重时会导致植物细胞死亡。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。

——《生物化学总汇》

愈创木酚与POD反应后,生成褐色物质,并在一定范围内成正比例增加吸光值。

P5218069

本次实验用的试剂

P5218072

离心后,上清液为POD的粗提取液

P5218073

最后用分光光度计测定它酶解的速度

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再进无机实验室

星期六, 五月 17th, 2008

2008-05-17

再进无机实验室

今天很有趣,值得纪念的一天,我们又走进了无机实验室。很怀念这里,因为这里沉淀着我们的大一时光!为了评估,要去复习以前的知识。废话不多说,马上开始做。

(一)NaoH溶液的标定;

实验原理:酸和碱的中和反应;用的酸是邻苯二甲酸氢钾,再加上酚酞,用NaoH溶液进行标定。

P5177966

先用电子天平称量邻苯二甲酸氢钾。图中的大约是0.5g。

P5177968

碱式滴定管中的是NaoH溶液,锥形瓶中的是邻苯二甲酸氢钾。

P5177969

你能看到微粉红色吗?这就是滴定的终点。然后三个实验样品进行水平比较计算,算出数值及平均差值。

(二)铁的总量的测定;

用的是邻菲啰啉,Fe2+能够与邻菲啰啉生成稳定的橙红色配合物。

QQ截图未命名

我用Chemdraw画了一个反应式。

P5177975

从左到右准备了六支作标准曲线,可以明显看到了随铁量的增加,颜色逐渐加深。右边的两支是待测样品。

P5177982

最后用分光光度计测定各溶液的消光值。  

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生化实验室(1)——总糖与还原糖的测定

星期三, 四月 2nd, 2008

2008-04-02

生物化学实验室(1)–总糖与还原糖的测定

这个实验是测定总糖与还原糖的量。

实验原理:对于测定还原糖的量,是个难题。因为它是一种无色有味的有机物。然后,我们的前辈发现,它与3,5–二硝基水杨酸(DNS)在加热状态下会产生棕红色物质。并且,在一定范围内,棕红色物质还会与还原糖的量成正比。正因为i如此,我们就通过分光光度计来测定反应后的溶液的吸光度,再通过标准曲线而求得还原糖的质量。

上图展示的是我的同学在定量滴加DNS。

上图是我们在做分光光度计的时候,碰见一位大四的师兄也在做分光光度计的实验,但与我们不同,他做的是为毕业论文服务的实验。所以试管多得吓人。呵呵。

在试验后,前天做微生物实验讲到的那位靓仔研究员给我们讲如何用EXCEl做标准曲线。图中的是我们的任课老师,至于那位靓仔,呵呵,我还没有拍到他的芳容。

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