大艺帝国

2008-10-26

细胞学实验（5）——核酸的染色观察

实验目的在于利用染色，清晰观察到RNA、DNA。利用的是洋葱鳞茎内表皮、甲基绿-派律宁染色液，染色时间为30min。另外，本次实验也设置了一个负对照实验，用强酸（本次用的是三氯乙酸）先处理负对照切片15min。

▲  显微镜10×10；在常规切片中，RNA显红色，DNA显蓝绿色。图中看到的条形状物质是植物细胞质，质壁分离的结果。但还能明显看到RNA被染色。（rRNA>tRNA>mRNA）

▲  显微镜40×10；仔细观察细胞核，可以看到其显蓝绿色，注意到，里面还有红色的点状物，那是核仁，它是单个或多个的匀质球状体，呈中圆形或椭圆形的颗粒状结构。图中的些许白色的空隙就是核仁，里面有染为红色的rRNA。

▲  显微镜40×10；为了再看清楚，它的面貌，特意问小权同学借了手机的灯光和把自己的相机调为10倍光学变焦，这下子可清晰啦：当中明显的区域可看到两个，由于灯光光色的影响，染色无法看到，但核仁及染色的rRNA还是被肉眼目睹了。

▲  显微镜10×10；负对照的切片中，核酸被强酸处理掉了，没有染色。

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补充：在本次的实验中，应该在细胞质中观察到蓝绿色的染色颗粒，因为线粒体与叶绿体中含有DNA，但是洋葱鳞茎内表皮中不含叶绿体，再者，虽然线粒体的含量不少，但仍难以观察（详细看前面的：细胞学实验三 线粒体的染色观察）。这次自己的切片没有清晰拍摄到细胞质中的蓝绿色，有点可惜。

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2008-10-05

细胞生物学实验（3）——活性细胞的液泡系[1]与线粒体的染色

1.实验目的：使用了染色技术，更容易在光学显微镜下观察原本无色的细胞器；

2.材料：洋葱鳞茎内表皮，中性红，詹姆斯绿B

3.步骤：

3.1液泡系：中性红+内表皮，5-10min，吸走，Ringer溶液[2]，光学显微镜观察；

3.2线粒体：詹姆斯绿B+内表皮，10-20min，吸走，Ringer溶液，光学显微镜观察；

4.结果：

上图为中性红溶液染色的洋葱鳞茎内表皮（部分）

（相机换为长焦机后，拍显微镜图很困难）

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[1] 液泡系

液泡系 vacuolar system 在电子显微镜下可明确地看到在细胞内有内质网、高尔基体、核膜等的囊状结构，它们互相吻合，在细胞内构成复杂的网状结构。如果从立体的角度来看，这些囊状结构形成一个内腔连接起来的膜系，并能与外部的细胞质基质区别开来。E.D.P.deRobertis等（1960）将这种膜系称作液泡系。（来源于网络）

[2] Ringer溶液

林格氏（Ringer’s）液
即：复方氯化钠注射液
【成分】氯化钠0.82%～0.9%、氯化钾0.025%～0.035%、氯化钙0.03%～0.036%。
渗透压与血浆渗透压相等。（来源于网络）

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2008-10-10

上网找到了 两张同题图片。

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2008-05-26

微生物实验室（9）——芽孢染色法

今天的实验是最后一个微生物实验了，时间过得真快，与细菌的感情才刚刚开始的样子……也就是说这个微生物实验室的小专题没有什么特殊的情况出现的话，就会结束的了。

先回顾上一次的实验：

葡萄糖的一支从蓝色变为黄色，证明了菌种糖酵解后使其环境变为酸性

不同的菌对糖、醇的分解能力不同，有些会产生气泡，有些则否。实验的目的在于利用糖的利用能力来作为鉴定菌种的依据之一。

———————-我是可爱的分割线————————–

实验原理：芽孢难以染色和脱色，利用这一原理，我们就通过加入强染色液与加热来对芽孢进行染色，再把菌体脱色，染上对比强的颜色，在显微镜下观察；

芽孢的结构（来之于百度图片）

枯草芽孢杆菌显微图（10*100，油镜）

苏云芽孢杆菌显微图（16*100，油镜）

苏云芽孢杆菌显微图（16*100，油镜）  ，是上图的局部 。

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微生物实验室结束了，谢谢大家的支持！

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