大艺帝国

2008-10-26

细胞学实验（5）——核酸的染色观察

实验目的在于利用染色，清晰观察到RNA、DNA。利用的是洋葱鳞茎内表皮、甲基绿-派律宁染色液，染色时间为30min。另外，本次实验也设置了一个负对照实验，用强酸（本次用的是三氯乙酸）先处理负对照切片15min。

▲  显微镜10×10；在常规切片中，RNA显红色，DNA显蓝绿色。图中看到的条形状物质是植物细胞质，质壁分离的结果。但还能明显看到RNA被染色。（rRNA>tRNA>mRNA）

▲  显微镜40×10；仔细观察细胞核，可以看到其显蓝绿色，注意到，里面还有红色的点状物，那是核仁，它是单个或多个的匀质球状体，呈中圆形或椭圆形的颗粒状结构。图中的些许白色的空隙就是核仁，里面有染为红色的rRNA。

▲  显微镜40×10；为了再看清楚，它的面貌，特意问小权同学借了手机的灯光和把自己的相机调为10倍光学变焦，这下子可清晰啦：当中明显的区域可看到两个，由于灯光光色的影响，染色无法看到，但核仁及染色的rRNA还是被肉眼目睹了。

▲  显微镜10×10；负对照的切片中，核酸被强酸处理掉了，没有染色。

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补充：在本次的实验中，应该在细胞质中观察到蓝绿色的染色颗粒，因为线粒体与叶绿体中含有DNA，但是洋葱鳞茎内表皮中不含叶绿体，再者，虽然线粒体的含量不少，但仍难以观察（详细看前面的：细胞学实验三 线粒体的染色观察）。这次自己的切片没有清晰拍摄到细胞质中的蓝绿色，有点可惜。

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2008-05-14

今天我们做的实验是紫外线法测定核酸的含量，实在太简单了，因为所有的原料都是老师准备好的，DNA的提取并没有要我们做。另外，虽然标题是核酸的测定，其实在实验中由始到终都是测定脱氧核糖核酸（DNA）。

核酸，就是许多核苷酸聚合而成的生物大分子化合物。分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。

在DNA样品盒中用移液枪提取20ml。

之后用容量瓶定容到100ml。

用紫外线分光机测定样品、标准溶液的消光值 。

公式：

其中：OD260nm 为260nm 处的DNA的消光值；L 为比色皿的光径（cm）；0.020 为1μg/mL DNA 钠盐的光密度。

(实验当中的标准曲线只是用来测试一下我们实验的精确度，没有对计算结果有其它的关系。)

美妙地，实验就这样结束了，实在太快了。

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