文章关键字 ‘测定’

生化实验室(7)——紫外线法测定核酸的含量

2008年05月14号,星期三

2008-05-14

今天我们做的实验是紫外线法测定核酸的含量,实在太简单了,因为所有的原料都是老师准备好的,DNA的提取并没有要我们做。另外,虽然标题是核酸的测定,其实在实验中由始到终都是测定脱氧核糖核酸(DNA)。

核酸,就是许多核苷酸聚合而成的生物大分子化合物。分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。

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在DNA样品盒中用移液枪提取20ml。

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之后用容量瓶定容到100ml。

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用紫外线分光机测定样品、标准溶液的消光值 。

 

公式:

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其中:OD260nm 为260nm 处的DNA的消光值;L 为比色皿的光径(cm);0.020 为1μg/mL DNA 钠盐的光密度。

(实验当中的标准曲线只是用来测试一下我们实验的精确度,没有对计算结果有其它的关系。)

美妙地,实验就这样结束了,实在太快了。

生化实验室(7)—维生素C含量的测定

2008年05月7号,星期三

2008-05-07

生化实验室(7)—维生素C含量的测定

(题外话:今天的火炬传递到了广州,却恰好碰上了实验课,呵呵,只好留在实验室中,但是广州的百姓都很热情!下面,贴上几张图吧!)

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广州的百姓很热情(图片转自 大洋网)

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人潮满载,水泄不通!(图片转自 网络)

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在街道上有不少的商铺自己挂出国旗!

中国!加油!!

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好了,开始今天的实验:维生素C(抗坏血酸)含量的测定

实验材料:桔子。

实验原理:

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维生素C在酸性环境下可以还原2,6-二氯酚靛酚为无色状态,同时,自身被氧化为脱氢维生素C,利用这一原理,我们通过滴定就可以知道了材料中的维生素C的含量。

书上面说,这个方法有三大缺点:

1)无法测出脱氢、结合抗坏血酸;

2)生物材料中可能含有其他的还原物质,影响结果;

3)生物材料中的色素影响滴定结果,为了免除这个影响,我们可以先用白陶土来脱色;

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称取桔子数克,加入草酸研磨,再用草酸定容。

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定容。定容器中蓝色的就是2,6-二氯酚靛酚。

生化实验室(2)——用考马斯亮蓝G-250测定蛋白质的含量

2008年04月9号,星期三

2008-04-09
生化实验室(2)——用考马斯亮蓝G-250测定蛋白质的含量

今天做的是测定蛋白质;通过昨天的生化课,我们知道了测定蛋白质最常用的是八种方法:双缩脲试剂、米伦氏反应、乙醛酸反应……考马斯亮蓝这八种。我在高中就做过了双缩脲和乙醛酸两个了,今天做得是用考马斯亮蓝来测定,书上说,这种方法非常精确,是双缩脲灵敏度的100倍!
其实,这个实验的原理和上一个测定还原糖含量的差不多。都是利用分光光度计来进行对比,然后得结果。

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这是蛋白质,用来制作标准曲线,后面深蓝色的是考马斯亮蓝G-250。

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保证两端的离心管的质量相等。为什么要离心管?因为我们用的材料是豆芽,研磨后通过高速离心可以使蛋白质溶液沉降下来;为什么要平衡?因为这是离心机的使用规则,看下图:

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这就是我们用的离心机,四个孔,要对向放置。(呵呵,不会像马桶吧,我以前用的都不是这样子的。)

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大家都知道了吧:分光光度计

至于实验步骤、实验材料……呵呵……这些东西网上很多,也不是我写的范围。分享实验乐趣才是我的目标。我这里有一个:《生物化学实验总汇》.pdf,有兴趣的朋友可以下载。

注:《生物化学实验总汇》在网络上收集,版权归原创者所有!