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生化实验室(10)——酶活力的测定

星期四, 六月 12th, 2008

2008-06-12

生化实验室(10)——酶活力的测定

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(图一)

有一个很有趣的例子:你要到山的另一边,你选择的是爬到山顶再过去还是走山底隧道呢?(不要说是愚公移山这么一劳永逸的想法,我个人还是觉得愚公他老人家尝试挖隧道要比移山要好。)

明显地,选山底隧道在很多时候是个最佳方案。这和酶的思维其实一样,降低化学反应的活化能。

故今天我们就来测定一下它的活力了。众所周知,酶的活力与温度、PH、气压等外界条件有密切的关系,可这些今天都排除在外。

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做实验的材料是发芽的小麦,测定的是里面的淀粉酶。为什么要选择发芽的?这很容易解释:种子生长,新陈代谢加强,酶就多了。

然后有两点知识点:

1)淀粉酶可以把淀粉水解为麦芽糖;

2)水杨酸和麦芽糖反应,生成颜色与浓度成正比的橙黄色化合物,可以用分光法作出标准曲线,然后计算出酶的活力;

过程我就不写了,网上有很多。

 

*注:( 图一 来源于网络)

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生化实验室(9)——酮体的生成与测定

星期三, 五月 28th, 2008

2008-05-28

生化实验室(9)——酮体的生成与测定

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肝脏是我们身体中新陈代谢的重要器官,也是一座化工厂!

脂肪酸在肝脏中氧化分解所生成的乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮三种中间代谢产物,统称为酮体。

酮体生成及利用的生理意义:
(1)在正常情况下,酮体是肝脏输出能源的一种形式:由于酮体的分子较小,故被肝外组织氧化利用,成为肝脏向肝外组织输出能源的一种形式。
(2)在饥饿或疾病情况下,为心、脑等重要器官提供必要的能源:在长期饥饿或某些疾病情况下,由于葡萄糖供应不足,心、脑等器官也可转变来利用酮体氧化分解供能。

“社会一旦有技术上的需要,则这种需要就会比十所大学更能把科学推向前进。”——恩格斯

我觉得科学的目的应该在于知道它有什么用。所以这个实验就可以让我们去测定液体中的酮体的含量,你问我测定酮体有什么实际用途:

在饥饿、高脂低糖膳食及糖尿病时,脂肪动员加强,脂肪酸氧化增多,酮体生成过多,超过肝外组织利用酮体的能力,引起血中酮体升高,当高过肾回收能力时,则尿中出现酮体,即为酮症(ketosis)。因酮体中乙酰乙酸及β-羟丁酸都是相对强的有机酸,如在体内堆积过多可引起代谢性酸中毒

这对于糖尿病患者是一个有用的测定,会在医院中用到。

———————我是一条可爱的分隔线———————–

我们实验用的是碘仿反应测定;两支滴定管,一个是滴定锥形瓶中的碘含量,一个是滴定反应后碘的含量(因为酮体可与碘生成碘仿),然后一相减,便可计算出酮体的量。(滴定管中的是硫代硫酸钠溶液。)

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生化实验室(1)——总糖与还原糖的测定

星期三, 四月 2nd, 2008

2008-04-02

生物化学实验室(1)–总糖与还原糖的测定

这个实验是测定总糖与还原糖的量。

实验原理:对于测定还原糖的量,是个难题。因为它是一种无色有味的有机物。然后,我们的前辈发现,它与3,5–二硝基水杨酸(DNS)在加热状态下会产生棕红色物质。并且,在一定范围内,棕红色物质还会与还原糖的量成正比。正因为i如此,我们就通过分光光度计来测定反应后的溶液的吸光度,再通过标准曲线而求得还原糖的质量。

上图展示的是我的同学在定量滴加DNS。

上图是我们在做分光光度计的时候,碰见一位大四的师兄也在做分光光度计的实验,但与我们不同,他做的是为毕业论文服务的实验。所以试管多得吓人。呵呵。

在试验后,前天做微生物实验讲到的那位靓仔研究员给我们讲如何用EXCEl做标准曲线。图中的是我们的任课老师,至于那位靓仔,呵呵,我还没有拍到他的芳容。

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