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微生物实验室(8)——甘油保存法、微生物的糖类发酵

星期一, 五月 19th, 2008

2008-05-19

微生物实验室(8)——甘油保藏法、微生物的糖类发酵

实验前,全体同学起立默哀三分钟。

今天下做到了两个实验,第一个实验是一个有趣的思路,对,不是动手,而是思路!

实验一:甘油保藏法

我在之前的就读过关于昆虫在极低温环境下的生存故事。重要的秘密就在于体内的甘油。大家都是知道了水在零摄氏度的环境下(请暂时不要考虑一标准大气压等因素)会凝固,其实在生物体液内,往往存在盐份等其他物质,令水在零度并不冷却,其为过冷却现象。具体的大家可以看一下物理上比热容的章节。

在某些冬眠状态的昆虫体液中,甘油含量可高达25%,以致在-35℃的状况下也不会冰冻。

百度百科——低温生物学

另一方面,细胞膜上的不饱和脂肪酸的也起了重要的作用。它的生理功能包括了保持细胞膜的相对流动性,以保正细胞的正常生理功能。使温度降低时细胞依然保持运动力。

脂肪酸的双键几乎总是顺式几何构型,这使不饱和脂肪酸的烃链有约30°的弯曲,干扰它们堆积时有效地填满空间,结果降低了范德华相互反应力,使脂肪酸的熔点随其不饱和度增加而降低。

雅虎知识堂

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把菌液高速低温离心。

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离心后,取得菌种。图中离心管的最下端的那点沉淀就是千千万万的细菌了。

之后倒掉上清液,加入新的培养基和甘油,速冻后,放在-90℃下,就可以保存3到5年。

实验二:微生物的糖类发酵

实验的目的在于测试菌对不同糖类的分解能力。(其实书上面做的是测试不同的菌种对糖类的分解能力,但是我们的实验只是用了大肠杆菌、并用了三种糖)

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图中左边红色是溴麝香草酚蓝,作为指示剂,其在碱性溶液中呈蓝色,在酸性溶液中呈黄色。锥形瓶中是培养基的原料,其中含有磷酸氢二钾,所以向瓶中加入了溴麝香草酚蓝后,有蓝色的出现。

磷酸氢二钾 白色结晶或无定形粉末。易溶于水,水溶液呈微碱性。微溶于醇。有吸湿性。 

百度百科——磷酸氢二钾

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做好的四瓶培养基:不含糖、含葡萄糖、含蔗糖、含乳糖。

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穿刺法接种后,用凡士林(我们用了琼脂)封着,造无氧环境,糖酵解。

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