大艺帝国

2008-05-19

微生物实验室（8）——甘油保藏法、微生物的糖类发酵

实验前，全体同学起立默哀三分钟。

今天下做到了两个实验，第一个实验是一个有趣的思路，对，不是动手，而是思路！

实验一：甘油保藏法

我在之前的就读过关于昆虫在极低温环境下的生存故事。重要的秘密就在于体内的甘油。大家都是知道了水在零摄氏度的环境下（请暂时不要考虑一标准大气压等因素）会凝固，其实在生物体液内，往往存在盐份等其他物质，令水在零度并不冷却，其为过冷却现象。具体的大家可以看一下物理上比热容的章节。

在某些冬眠状态的昆虫体液中，甘油含量可高达25％，以致在-35℃的状况下也不会冰冻。

百度百科——低温生物学

另一方面，细胞膜上的不饱和脂肪酸的也起了重要的作用。它的生理功能包括了保持细胞膜的相对流动性，以保正细胞的正常生理功能。使温度降低时细胞依然保持运动力。

脂肪酸的双键几乎总是顺式几何构型，这使不饱和脂肪酸的烃链有约30°的弯曲，干扰它们堆积时有效地填满空间，结果降低了范德华相互反应力，使脂肪酸的熔点随其不饱和度增加而降低。

雅虎知识堂

把菌液高速低温离心。

离心后，取得菌种。图中离心管的最下端的那点沉淀就是千千万万的细菌了。

之后倒掉上清液，加入新的培养基和甘油，速冻后，放在-90℃下，就可以保存3到5年。

实验二：微生物的糖类发酵

实验的目的在于测试菌对不同糖类的分解能力。（其实书上面做的是测试不同的菌种对糖类的分解能力，但是我们的实验只是用了大肠杆菌、并用了三种糖）

图中左边红色是溴麝香草酚蓝，作为指示剂，其在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈黄色。锥形瓶中是培养基的原料，其中含有磷酸氢二钾，所以向瓶中加入了溴麝香草酚蓝后，有蓝色的出现。

磷酸氢二钾 白色结晶或无定形粉末。易溶于水，水溶液呈微碱性。微溶于醇。有吸湿性。 

百度百科——磷酸氢二钾

做好的四瓶培养基：不含糖、含葡萄糖、含蔗糖、含乳糖。

穿刺法接种后，用凡士林（我们用了琼脂）封着，造无氧环境，糖酵解。