2008-12-16
细胞学实验（8）—— 细胞的凋亡
1.目的与背景
1.1 了解细胞凋亡的检测方法与形态学上的观察；
1.2 细胞死亡
生老病死是生命中普遍的现象，细胞的更替在生命中扮演重要的角色，也具有细胞死亡的现象。正常的组织中，经常发生“正常”的细胞死亡，它是维持组织机能和形态所必需的。目前的对于细胞死亡主要分为两大类：程序性死亡和非程序性死亡[1] 。
细胞死亡的分类：
● 程序性死亡
1. 凋亡
2. 自吞噬性程序性细胞死亡
3. Paraptosis
4. 细胞有丝分裂灾难
5. 胀亡
● 非程序性死亡
程序性死亡是在毒细胞中对目标细胞的调解使其死亡的一种方式，相比起细胞坏死党的外界刺激作用而亡，程序式死亡是源于细胞内遗传性控制的生活周期，存在于多细胞生物中。 [2]
非程序性细胞死亡，即坏死，是指细胞在受到环境中的物理或化学刺激时所发生的细胞被动死亡。
2008-11-25
细胞学实验（6）——细胞融合
1.实验目的
细胞的融合，能够打破种间繁殖隔阂。细胞融合术是细胞遗传学、细胞免疫学、病毒学、肿瘤学等研究的一重要手段，也是制备单克隆细胞株的重要技术。
2008-10-26
细胞学实验（5）——核酸的染色观察
实验目的在于利用染色，清晰观察到RNA、DNA。利用的是洋葱鳞茎内表皮、甲基绿-派律宁染色液，染色时间为30min。另外，本次实验也设置了一个负对照实验，用强酸（本次用的是三氯乙酸）先处理负对照切片15min。
▲ 显微镜10×10；在常规切片中，RNA显红色，DNA显蓝绿色。图中看到的条形状物质是植物细胞质，质壁分离的结果。但还能明显看到RNA被染色。（rRNA>tRNA>mRNA）
▲ 显微镜40×10；仔细观察细胞核，可以看到其显蓝绿色，注意到，里面还有红色的点状物，那是核仁，它是单个或多个的匀质球状体，呈中圆形或椭圆形的颗粒状结构。图中的些许白色的空隙就是核仁，里面有染为红色的rRNA。
▲ 显微镜40×10；为了再看清楚，它的面貌，特意问小权同学借了手机的灯光和把自己的相机调为10倍光学变焦，这下子可清晰啦：当中明显的区域可看到两个，由于灯光光色的影响，染色无法看到，但核仁及染色的rRNA还是被肉眼目睹了。
▲ 显微镜10×10；负对照的切片中，核酸被强酸处理掉了，没有染色。
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补充：在本次的实验中，应该在细胞质中观察到蓝绿色的染色颗粒，因为线粒体与叶绿体中含有DNA，但是洋葱鳞茎内表皮中不含叶绿体，再者，虽然线粒体的含量不少，但仍难以观察（详细看前面的：细胞学实验三 线粒体的染色观察）。这次自己的切片没有清晰拍摄到细胞质中的蓝绿色，有点可惜。
2008-10-19
细胞骨架
真核细胞内含有蛋白纤维网络结构，对于细胞本身的形态结构、生命活动等有重要的意义。
细胞骨架不仅在维持细胞形态，承受外力、保持细胞内部结构的有序性方面起重要作用，而且还参与许多重要的生命活动，如：在细胞分裂中细胞骨架牵引染色体分离，在细胞物质运输中，各类小泡和细胞器可沿着细胞骨架定向转运；在肌肉细胞中，细胞骨架和它的结合蛋白组成动力系统；在白细胞(白血球)的迁移、精子的游动、神经细胞轴突和树突的伸展等方面都与细胞骨架有关。另外，在植物细胞中细胞骨架指导细胞壁的合成。
——百度百科
经过了多层处理膜结构，再经过考马斯亮蓝染色，在光学显微镜下可以看到细胞骨架结构。
2008-10-12
细胞实验室（3）——POD的测定
根据自由基学说，我们的细胞内不断地进行氧化还原反应，产生了大量的自由基（没有成对的电子，活泼）
自由基对人体的损害主要有三个方面：
一、使细胞膜被破坏；
二、使血清抗蛋白酶失去活性；
三、损伤基因导致细胞变异的出现和蓄积。——百度百科
面对这些自由基，身体内消灭自由基的物质主要有三种：SOD、POD、CAT。
SOD：超氧化物歧化酶
POD：过氧化物酶
CAT：过氧化氢酶
本次实验做的是：POD
上图为百合花粉的过氧化物酶定位，花粉被染为紫红色，证明其有活性。
洋葱内表皮的染色，细胞质中具有过氧化物酶，具有活性。
