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生化实验室(2)——用考马斯亮蓝G-250测定蛋白质的含量

星期三, 四月 9th, 2008

2008-04-09
生化实验室(2)——用考马斯亮蓝G-250测定蛋白质的含量

今天做的是测定蛋白质;通过昨天的生化课,我们知道了测定蛋白质最常用的是八种方法:双缩脲试剂、米伦氏反应、乙醛酸反应……考马斯亮蓝这八种。我在高中就做过了双缩脲和乙醛酸两个了,今天做得是用考马斯亮蓝来测定,书上说,这种方法非常精确,是双缩脲灵敏度的100倍!
其实,这个实验的原理和上一个测定还原糖含量的差不多。都是利用分光光度计来进行对比,然后得结果。

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这是蛋白质,用来制作标准曲线,后面深蓝色的是考马斯亮蓝G-250。

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保证两端的离心管的质量相等。为什么要离心管?因为我们用的材料是豆芽,研磨后通过高速离心可以使蛋白质溶液沉降下来;为什么要平衡?因为这是离心机的使用规则,看下图:

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这就是我们用的离心机,四个孔,要对向放置。(呵呵,不会像马桶吧,我以前用的都不是这样子的。)

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大家都知道了吧:分光光度计

至于实验步骤、实验材料……呵呵……这些东西网上很多,也不是我写的范围。分享实验乐趣才是我的目标。我这里有一个:《生物化学实验总汇》.pdf,有兴趣的朋友可以下载。

注:《生物化学实验总汇》在网络上收集,版权归原创者所有!

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多肽抗生素

星期四, 四月 3rd, 2008

2008-04-03

多肽抗生素

蛋白质的一到四级结构。

蛋白质的二级结构的α–螺旋,右手螺旋

今天上生物化学课,真的很享受听课的日子。特别是我们这个学期的专业课,他们总可以给我带来学习的灵感。呵呵,不知道是人的改变还是老师的改变呢?

今天讲蛋白质的结构,我没有在这里重复上课内容的嗜好,而是想说一下老师延伸讲到的多肽抗生素。通过《新发现》,我知道了抗生素和金黄色葡萄菌的敌对关系,也一直在关注这场战役的生物膜,想不到,今天老师讲到了多肽抗生素,给我很大的启发。他声称,这是科学家新发现的,但我上网查一下关于这方面的信息,发现在2005年在网上就有了这方面的文章,而且,在上世纪的80年代就开始兴起这新发现的研究。

然后,我开始关心它的灭菌机理,我问过老师,但是他的答案很简单,所以我特意再找了一下这方面的文章:”大多数多肽抗生素都具有抗细菌的作用。目前认为cecropins、magainins、defensins等许多可形成双亲螺旋结构的多肽抗生素是通过作用于细菌的细胞膜,在膜上形成离子通道,引起胞内物质的外漏而杀死细菌的。”

老师说,用多肽抗生素要比用抗生素安全,而且不会引起抗病性,但我在此提出两个疑问:1.多肽抗生素是一种氨基酸,当它进入人体的环境中,也会被多肽酶分解;2.”生活在人体肠道内数以万亿的细菌,被统称为肠道菌群,它们和人体有着密不可分的互利共生关系。”多肽抗生素不是一样都杀吗?

有兴趣的朋友可以到网上找一下相关的论文。

资料来源:

http://www.humed.cn/view.php?tid=22850&cid=4

http://www.hoodong.com/wiki/%E5%A4%9A%E8%82%BD%E7%B1%BB%E6%8A%97%E7%94%9F%E7%B4%A0

http://www.sjtu.edu.cn/newsnet/newsdisplay.php?id=15303

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