大艺帝国

2008-06-15

生化实验室（11）——糖酵解中间产物的鉴定

实验的原理：利用碘乙酸对糖酵解过程中3-磷酸甘油醛脱氢酶的抑制作用，使3-磷激甘油醛不再向前变化而积累。硫酸肼作为稳定剂，用来保护3-磷酸甘油醛使不自发分解。然后用2，4-二硝基苯肼与3-磷酸甘油醛在碱性条件下形成2，4-二硝基苯肼-丙糖的棕色复合物，其棕色程度与3-磷酸甘油醛含量成正比。

产生糖酵解，当然需要生物了，我们用了酵母。

三支试管，1号管：加入了三氯醋酸，破坏了全部的酶，所以不可进行糖酵解；2号管，放进碘乙酸，对糖酵解过程中3-磷酸甘油醛脱氢酶的起抑制作用，3号管，什么都不加。放进37℃中，然后就可以看到，3号管发酵得最爽。泡泡是CO₂ 。

然后为了验证 “3-磷酸甘油醛不再向前变化而积累”，所以我们再对2、3号管进行处理。步骤不说了，看最后的结果，说明了2号管的3-磷酸甘油醛最多，也就是证明了碘乙酸的抑制剂作用。

做这些实验不是为了实验，而是为了学到东西；通过这个实验，我们得到了两个很爽的想法：

1.碘乙酸的抑制剂作用；

2.原来在糖酵解的分解循环中，中间产物有3-磷酸甘油醛；

这对于我们学习与研究糖酵解很有益处！

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2008-05-21

生化实验室（8）——过氧化氢酶（POD）活性的测定

实验目的：植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内自由基代谢平衡被破坏而有利于自由基的产生。过剩自由基的毒害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。

——《生物化学总汇》

愈创木酚与POD反应后，生成褐色物质，并在一定范围内成正比例增加吸光值。

本次实验用的试剂

离心后，上清液为POD的粗提取液

最后用分光光度计测定它酶解的速度

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